产品基本信息

• 产品货号 KX0110047
• 产品名称 BioShuttle PEI-293贴壁细胞转染试剂
• 类别 转染试剂
• 产品描述 用途：用于贴壁细胞的瞬时转染和稳定细胞系构建；
  运输保存：QuickPEI转染试剂建议常温运输；无菌取用；-20 ºC保存，有效期24个月；-80 ºC可长期保存；若冷冻保存，解冻后于2~8ºC保存（可保存6个月），避免反复冻融，影响转染效果；  
  过滤条件：本产品经经 0.22µm滤膜过滤除菌。
   
  产品描述
  QuickPEI转染试剂是一种化合物转染试剂，不含动物源性成分，是一种功能强大的瞬时转染试剂。为贴壁细胞提供高效且可重复的基因递送方案。在HEK293和CHO表达系统中，QuickPEI在大范围内提供均一的高基因表达（96孔板至100L生物反应器）。特别适用于自动预制或手动 HTS（高通量筛选）转化方案，可用于抗体表达，各种病毒包装如AAV，慢病毒，腺病毒，及重组蛋白的试剂。
   
   
  贴壁细胞转染使用方法（以6孔板为例）:
  1. 接种细胞：为了提高转染效率，建议转染前24小时接种细胞（如293细胞）到6孔细胞板中，每孔5~10×10⁵细胞，3ml完全培养基，转染时细胞密度在70%~80%为宜。
  2. 准备DNA-PEI复合物：按照以下体系配制DNA-PEI核酸-转染试剂复合物：
  1）对于每孔细胞，使用100 μL无血清稀释液（如DMEM等) 稀释2 μg目的DNA，充分混匀成DNA稀释液。
  【注】无血清稀释液建议采用Opti-MEM、DMEM或ddH₂O，使用Opti-MEM更佳。
  2）立刻向100 μL的DNA稀释液中加入6 μL的QuickPEI转染试剂，轻轻混匀。DNA：PEI（质量体积比， µg:µl) 比例可以按需调整
  3）在室温下孵育10~15 min，形成DNA-阳离子核酸转染试剂复合物。
  3. 转染细胞：
  1）在形成复合物过程中，移除细胞生长培养基，每孔中加入2 mL新鲜预热的完全培养基。
  2）将全部DNA-PEI 复合物加入到细胞中，摇动培养板，轻轻混匀。
  3）37 ℃，5% CO2培养箱培养，转染后最快24 h即可检测到转染基因的表达。请自行确定适合检测时间。
  4. 稳转筛选（可选）
  转染24 h后，将细胞传代至新鲜的生长培养基中（将细胞稀释10倍以上），37 ℃，5% CO2培养箱孵育过夜。第二天加入与转染抗性基因相匹配的筛选药物。约1~2周可筛选到耐药性克隆，在这期间需经常更换含筛选药物的生长培养基。
   
   
   
  附表1 QuickPEI用量一览表（以DNA:PEI比例1:3为例，仅供参考，建议优化）

  培养器皿	表面积(cm2)	培养基用量(ml)	DNA用量(μg)/DMEM (μl)	转染试剂用量(μl)/DMEM (μl) 用量(μl)
  96孔板	0.4	0.2	0.1/25	0.3/25
  24孔板	2	1	0.5/50	1.5/50
  12孔板	4	2	1/50	3/50
  6孔板	9	3	2/100	6/100
  35mm培养皿	9	3	2/100	6/100
  60mm培养皿	21	6	4/200	12/200
  100mm培养皿	55	15	12/400	36/400
  25cm2培养瓶	25	7	6/200	7.5/200
  75cm2培养瓶	75	20	18/400	54/400
  175cm2培养瓶	175	50	40/1000	120/1000

   
   
  部分转染效果图：
  
  贴壁293T细胞转染效果（DNA:PEI=1 µg:3µl）
  
  
  
  不同DNA:PEI比例293T细胞转染测试结果：EGFP阳性质粒，实验24孔板,DNA:QuickPEI, 1:3,1:4,1:5 (DNA质量 PEI体积比µg:µl)
  
  
  QuickPEI转染包装AAV病毒侵染293T细胞

图片

产品详情

用途：用于贴壁细胞的瞬时转染和稳定细胞系构建；
运输保存：QuickPEI转染试剂建议常温运输；无菌取用；-20 ºC保存，有效期24个月；-80 ºC可长期保存；若冷冻保存，解冻后于2~8ºC保存（可保存6个月），避免反复冻融，影响转染效果；  
过滤条件：本产品经经 0.22µm滤膜过滤除菌。
 
产品描述
QuickPEI转染试剂是一种化合物转染试剂，不含动物源性成分，是一种功能强大的瞬时转染试剂。为贴壁细胞提供高效且可重复的基因递送方案。在HEK293和CHO表达系统中，QuickPEI在大范围内提供均一的高基因表达（96孔板至100L生物反应器）。特别适用于自动预制或手动 HTS（高通量筛选）转化方案，可用于抗体表达，各种病毒包装如AAV，慢病毒，腺病毒，及重组蛋白的试剂。
 
 
贴壁细胞转染使用方法（以6孔板为例）:
1. 接种细胞：为了提高转染效率，建议转染前24小时接种细胞（如293细胞）到6孔细胞板中，每孔5~10×10⁵细胞，3ml完全培养基，转染时细胞密度在70%~80%为宜。
2. 准备DNA-PEI复合物：按照以下体系配制DNA-PEI核酸-转染试剂复合物：
1）对于每孔细胞，使用100 μL无血清稀释液（如DMEM等) 稀释2 μg目的DNA，充分混匀成DNA稀释液。
【注】无血清稀释液建议采用Opti-MEM、DMEM或ddH₂O，使用Opti-MEM更佳。
2）立刻向100 μL的DNA稀释液中加入6 μL的QuickPEI转染试剂，轻轻混匀。DNA：PEI（质量体积比， µg:µl) 比例可以按需调整
3）在室温下孵育10~15 min，形成DNA-阳离子核酸转染试剂复合物。
3. 转染细胞：
1）在形成复合物过程中，移除细胞生长培养基，每孔中加入2 mL新鲜预热的完全培养基。
2）将全部DNA-PEI 复合物加入到细胞中，摇动培养板，轻轻混匀。
3）37 ℃，5% CO2培养箱培养，转染后最快24 h即可检测到转染基因的表达。请自行确定适合检测时间。
4. 稳转筛选（可选）
转染24 h后，将细胞传代至新鲜的生长培养基中（将细胞稀释10倍以上），37 ℃，5% CO2培养箱孵育过夜。第二天加入与转染抗性基因相匹配的筛选药物。约1~2周可筛选到耐药性克隆，在这期间需经常更换含筛选药物的生长培养基。
 
 
 
附表1 QuickPEI用量一览表（以DNA:PEI比例1:3为例，仅供参考，建议优化）

培养器皿	表面积(cm2)	培养基用量(ml)	DNA用量(μg)/DMEM (μl)	转染试剂用量(μl)/DMEM (μl) 用量(μl)
96孔板	0.4	0.2	0.1/25	0.3/25
24孔板	2	1	0.5/50	1.5/50
12孔板	4	2	1/50	3/50
6孔板	9	3	2/100	6/100
35mm培养皿	9	3	2/100	6/100
60mm培养皿	21	6	4/200	12/200
100mm培养皿	55	15	12/400	36/400
25cm2培养瓶	25	7	6/200	7.5/200
75cm2培养瓶	75	20	18/400	54/400
175cm2培养瓶	175	50	40/1000	120/1000

 

 

部分转染效果图：

贴壁293T细胞转染效果（DNA:PEI=1 µg:3µl）



不同DNA:PEI比例293T细胞转染测试结果：EGFP阳性质粒，实验24孔板,DNA:QuickPEI, 1:3,1:4,1:5 (DNA质量 PEI体积比µg:µl)


QuickPEI转染包装AAV病毒侵染293T细胞