产品基本信息

• 产品货号 BDIT0048S
• 产品名称 2×Taq PCR Mixture
• 类别 分子生物试剂
• 产品描述
  【产品概述】
  
  本产品为一种2×浓度的预混试剂，包含Taq DNA Polymerase、Mg2+、dNTP以及优化的缓冲液，操作简单并减少了污染的可能性，可实现高通量检测。只需向反应体系加入引物和模板即可进行PCR反应。体系中加入的保护剂使得2×Taq PCR Mixture反复冻融后仍保持较高的活性。产品中含有染料，PCR产物可以直接进行电泳检测。
  
  【产品特点】
  
  1. 产品为 2×预混液，使用简单方便；
  2. 扩增产物在 2kb 以内效果最佳；
  3. 扩增产物中 3’端加“A”碱基，纯化后可直接用于 TA 克隆。
  4. 产品中含有染料，PCR 产物可以直接进行电泳检测。
  
  【保存条件】
  -20℃恒温保存两年（-20-8℃运输）避免反复冻融。经常使用可放4℃短期保存。
  
  【实验流程】
  1.反应体系制备
   

  Reagent	Reagent Volume(µL per sample)		Final Conc.
  	Mix A	Mix B
  Taq PCR Mix (2×)	10	25	1×
  Forward Primer (10 μM)	0.5	1.0	0.25 μM
  Reverse Primer (10 μM)	0.5	1.0	0.25 μM
  DNATemplate*	Variable	Variable	/
  PCR Grade H2O	To 20	To 50	/
  Total volume per reaction	20	50

  
  备注 (Note)：
  * ：针对不同类型的 DNA 样本，Template的加入量不同，以20μL的反应体积为例，Template 的建议用量如下：

  DNA Template	Reagent Volume
  基因组DNA	20 ng ~ 100 ng
  质粒DNA	50 pg ~ 10 ng
  cDNA（产物原液）	1 μL ~ 5 μL (不超过反应体积的1/10)

   
  2. 反应程序

  Initial Denaturation	95℃	2 min
  Denaturation	95℃	25 sec		35-40循环
  Annealing*1	60℃	25 sec
  Extension*2	72℃	1 min
  Final Extension	72℃	7 min

  备注 (Note)：
  *1 ：Annealing 退火温度根据引物的实际退火温度(Ta)进行设置；
  *2 ：若进行分子鉴定延伸速度为 30sec/kb，若进行基因克隆建议 60sec/kb。
   
  3. 扩增产物检测
  PCR 扩增完成后，可直接进行琼脂糖凝胶电泳的检测。
  
  【注意事项】
  
  1. 产品解冻需要在冰上进行，并避免反复冻融；
  2. 使用前上下轻柔颠倒试剂瓶数次，确保各试剂成份完全混匀，未混匀试剂反应性能会有所下降；
  3. PCR 反应配制过程需在冰上进行，以减少反应准备阶段产生的非特异性扩增；
  4. 请仔细阅读本说明，严格按照操作流程和推荐的量使用本产品；
  5. 本产品仅供科学研究使用，不可用于临床诊断。
   

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产品详情

【产品概述】

本产品为一种2×浓度的预混试剂，包含Taq DNA Polymerase、Mg2+、dNTP以及优化的缓冲液，操作简单并减少了污染的可能性，可实现高通量检测。只需向反应体系加入引物和模板即可进行PCR反应。体系中加入的保护剂使得2×Taq PCR Mixture反复冻融后仍保持较高的活性。产品中含有染料，PCR产物可以直接进行电泳检测。

【产品特点】

1. 产品为 2×预混液，使用简单方便；
2. 扩增产物在 2kb 以内效果最佳；
3. 扩增产物中 3’端加“A”碱基，纯化后可直接用于 TA 克隆。
4. 产品中含有染料，PCR 产物可以直接进行电泳检测。

【保存条件】
-20℃恒温保存两年（-20-8℃运输）避免反复冻融。经常使用可放4℃短期保存。

【实验流程】
1.反应体系制备
 

Reagent	Reagent Volume(µL per sample)		Final Conc.
	Mix A	Mix B
Taq PCR Mix (2×)	10	25	1×
Forward Primer (10 μM)	0.5	1.0	0.25 μM
Reverse Primer (10 μM)	0.5	1.0	0.25 μM
DNATemplate*	Variable	Variable	/
PCR Grade H2O	To 20	To 50	/
Total volume per reaction	20	50

备注 (Note)：
* ：针对不同类型的 DNA 样本，Template的加入量不同，以20μL的反应体积为例，Template 的建议用量如下：

DNA Template	Reagent Volume
基因组DNA	20 ng ~ 100 ng
质粒DNA	50 pg ~ 10 ng
cDNA（产物原液）	1 μL ~ 5 μL (不超过反应体积的1/10)

 

2. 反应程序

Initial Denaturation	95℃	2 min
Denaturation	95℃	25 sec		35-40循环
Annealing*1	60℃	25 sec
Extension*2	72℃	1 min
Final Extension	72℃	7 min

备注 (Note)：
*1 ：Annealing 退火温度根据引物的实际退火温度(Ta)进行设置；
*2 ：若进行分子鉴定延伸速度为 30sec/kb，若进行基因克隆建议 60sec/kb。
 

3. 扩增产物检测

PCR 扩增完成后，可直接进行琼脂糖凝胶电泳的检测。

【注意事项】

1. 产品解冻需要在冰上进行，并避免反复冻融；
2. 使用前上下轻柔颠倒试剂瓶数次，确保各试剂成份完全混匀，未混匀试剂反应性能会有所下降；
3. PCR 反应配制过程需在冰上进行，以减少反应准备阶段产生的非特异性扩增；
4. 请仔细阅读本说明，严格按照操作流程和推荐的量使用本产品；
5. 本产品仅供科学研究使用，不可用于临床诊断。