货号 |
规格 |
BDIT0014-25 |
125μl(25T) |
BDIT0014-50 |
250μl(50T) |
BDIT0014-100 |
500μl (100T) |
介绍
不同于普通分子克隆方法,闪电克隆试剂盒通过简单的体外一步同源重组方法实现DNA克隆。该方法极大简化了克隆过程,无论是单链DNA,还是大到几百kb的DNA片段,均可以高效完成克隆构建。只需将载体质粒线性化,再用PCR方法将与载体质粒同源区(约15bp)导入目的基因片段两端,混合后加入重组酶,即完成质粒构建。该方法可以一步实现多个DNA片段按顺序同时插入载体质粒中。
特点
1. 利用同源重组原理,质粒构建只需设计引物进行PCR即可
2. 载体质粒和插入片段均可通过PCR扩增获得,彻底摆脱限制性内切酶
3. 引物设计很简单,只需在引物5’末端加入至少18 bp的重叠序列即可
4. 克隆片段之间既可无缝衔接,也可任意加入碱基或定点突变
5. 允许1-10个DNA片段一步克隆到同一个载体中
6. 允许100-200kb的超大片段克隆
7. 连接反应只需10-30分钟
8. 相比常规构建方法,重组效率更高、背景更低
参考数据:
(1)闪电克隆试剂盒工作示意图(以同时插入两片段为例):
(2)如需要引物设计方法请发送邮件至 tech@biodragon.cn