产品基本信息

• 产品货号 BDAG0035
• 产品名称 血液直扩探针法qPCR预混液(2×)
• 类别 分子生物试剂
• 产品描述
  
  
  
  备注：ROX Reference 为另行选配试剂，本产品未含。不同型号 Real-Time PCR 仪，使用方法如下：
  1) ROX Reference Ⅰ (50×)为高浓度 ROX，适用于如下型号 Real Time PCR 仪：
  - Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)；
  - Applied Biosystems 7900 Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)；
  - Step One Plus Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)。
  2) ROX Reference Ⅱ (50×)为低浓度 ROX， 适用于如下型号 Real Time PCR 仪：
  - Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)；
  - Applied Biosystems 7500 FAST Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)。
  3) 当使用于如下型号 Real Time PCR 扩增仪时，无需加入 ROX Reference：
  - Roche、Bio-Rad、TaKaRa 等其它无需加入 ROX 校准染料的 Real-Time PCR 仪。
  
  产品描述：
            本产品可针对血卡或血斑样本，无需进行核酸提取，进行 Taqman Probe 法直接 qPCR 反应，用于进行 基因含量检测、转基因检测等分子生物学实验。
            产品中使用了经过定向改造、并进行了抗体封闭的直扩型热启动聚合酶(Hot-Start DNA Polymerase)，配 合条件优化的热启动 qPCR 专用缓冲体系，对血液样本中的 PCR 抑制物具有极强的耐受性，可有效避免类 似于非热启动型聚合酶导致的非特异性扩增反应，从而提升 PCR 扩增效率。同时也能够针对不同 GC 含量 的基因完成理想扩增，获得高灵敏度的 qPCR 检测结果。
  
  产品特点
  1. 无需核酸提取或者纯化，直接将原始血液样本作为模板(Template)，进行 Taqman qPCR 反应，省时省力；
  2. 使用了抗体封闭的突变型聚合酶，可以进行 Hot Start 法 PCR 反应，与特别开发的 Buffer 系统相结合，
  具有高扩增效率、高扩增灵敏度的特点；
  3. 可针对高 GC 含量片段进行有效扩增，扩增能力强。
  
  扩增体系和条件
  1. 反应体系制备
  
  备注 ：
  *1: 0.2 μM 终浓度的引物(Primer)和探针(Probe)，可满足大部分的实验要求，用户亦可根据实际情况对引物和探针浓度进
  行调整；
  *2: Template 为原始全血样本，建议加入量为 PCR 反应体系的 5%，比如：如选择 20uL 反应体系，加入 1 µL 全血样本；
  如选择 50uL 反应体系，加入 2.5 µL 全血样本。若需加入超过 5%(v/v)的全血模板，可选择本公司另一款产品：增强型探针法
  血液直扩试剂盒(Blood-Direct Taqman qPCR Enhanced Kit)。
  
  2.反应程序
  
  
  
  注意事项
  1. Master Mix 使用前上下轻柔颠倒数次，确保各试剂成份完全混匀，并短暂离心收集试剂至容器底部，试
  剂如未充分混匀可能导致反应性能下降；
  2. Master Mix 置于 4℃的保存时间不应超过 1 周，长期保存置于-20℃；
  3. 配制 PCR 反应 Mix，各成份依次加入后需涡旋混匀并进行短暂离心；
  4. 请避免核酸酶污染样本，否则可能造成扩增反应出现困难的情况；
  5. ROX Reference 对光敏感，应避免强光照射；
  6. 为获得 S 形反应曲线，在使用 ROX 的反应体系中，建议将阈值设置为 0.1~0.2，基线设置为自动基线；
  在不使用 ROX 的反应体系中，将阈值设置为 5,000~100,000，基线一般设置为 3~15 Cycles。用户需根据实验具体情况进行调整，使阈值线处于反应的对数期 (线性图谱)或线性期(对数图谱)。
  7. 本产品仅供科学研究使用。
   

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产品详情

备注：ROX Reference 为另行选配试剂，本产品未含。不同型号 Real-Time PCR 仪，使用方法如下：
1) ROX Reference Ⅰ (50×)为高浓度 ROX，适用于如下型号 Real Time PCR 仪：
- Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)；
- Applied Biosystems 7900 Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)；
- Step One Plus Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)。
2) ROX Reference Ⅱ (50×)为低浓度 ROX， 适用于如下型号 Real Time PCR 仪：
- Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)；
- Applied Biosystems 7500 FAST Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)。
3) 当使用于如下型号 Real Time PCR 扩增仪时，无需加入 ROX Reference：
- Roche、Bio-Rad、TaKaRa 等其它无需加入 ROX 校准染料的 Real-Time PCR 仪。

产品描述：
          本产品可针对血卡或血斑样本，无需进行核酸提取，进行 Taqman Probe 法直接 qPCR 反应，用于进行 基因含量检测、转基因检测等分子生物学实验。
          产品中使用了经过定向改造、并进行了抗体封闭的直扩型热启动聚合酶(Hot-Start DNA Polymerase)，配 合条件优化的热启动 qPCR 专用缓冲体系，对血液样本中的 PCR 抑制物具有极强的耐受性，可有效避免类 似于非热启动型聚合酶导致的非特异性扩增反应，从而提升 PCR 扩增效率。同时也能够针对不同 GC 含量 的基因完成理想扩增，获得高灵敏度的 qPCR 检测结果。

产品特点

1. 无需核酸提取或者纯化，直接将原始血液样本作为模板(Template)，进行 Taqman qPCR 反应，省时省力；

2. 使用了抗体封闭的突变型聚合酶，可以进行 Hot Start 法 PCR 反应，与特别开发的 Buffer 系统相结合，

具有高扩增效率、高扩增灵敏度的特点；

3. 可针对高 GC 含量片段进行有效扩增，扩增能力强。

扩增体系和条件

1. 反应体系制备

备注 ：

*1: 0.2 μM 终浓度的引物(Primer)和探针(Probe)，可满足大部分的实验要求，用户亦可根据实际情况对引物和探针浓度进

行调整；

*2: Template 为原始全血样本，建议加入量为 PCR 反应体系的 5%，比如：如选择 20uL 反应体系，加入 1 µL 全血样本；

如选择 50uL 反应体系，加入 2.5 µL 全血样本。若需加入超过 5%(v/v)的全血模板，可选择本公司另一款产品：增强型探针法

血液直扩试剂盒(Blood-Direct Taqman qPCR Enhanced Kit)。

2.反应程序



注意事项
1. Master Mix 使用前上下轻柔颠倒数次，确保各试剂成份完全混匀，并短暂离心收集试剂至容器底部，试
剂如未充分混匀可能导致反应性能下降；
2. Master Mix 置于 4℃的保存时间不应超过 1 周，长期保存置于-20℃；
3. 配制 PCR 反应 Mix，各成份依次加入后需涡旋混匀并进行短暂离心；
4. 请避免核酸酶污染样本，否则可能造成扩增反应出现困难的情况；
5. ROX Reference 对光敏感，应避免强光照射；
6. 为获得 S 形反应曲线，在使用 ROX 的反应体系中，建议将阈值设置为 0.1~0.2，基线设置为自动基线；
在不使用 ROX 的反应体系中，将阈值设置为 5,000~100,000，基线一般设置为 3~15 Cycles。用户需根据实验具体情况进行调整，使阈值线处于反应的对数期 (线性图谱)或线性期(对数图谱)。
7. 本产品仅供科学研究使用。