产品基本信息

• 产品货号 BF06221-100
• 产品名称 His标签蛋白（竞争法）快速检测试剂盒（高敏版）
• 类别 WB、IHC、ELISA相关试剂
• 产品描述

  货号	规格
  BF06221-10	10条
  BF06221-100	100条

  常温保存，保质期一年
   
  一、简介
  His 标签蛋白（竞争法）快速检测试剂盒（高敏版）是基于胶体金侧向层析技术的蛋白
  半定量检测试剂。主要结构由样品垫、金标垫、层析膜、吸水纸、背板等组成。在层析膜上
  固定有金标抗体的二抗（质控线）和带有 His-tag 的蛋白（检测线）；在金标垫上固定有胶
  体金标记的抗 His-Tag 的单克隆抗体。当待测样品滴加到样品垫时，通过毛细作用，液体向
  金标垫移动。当不含有 His-Tag 蛋白的待测样品通过金标垫时，His-Tag 金标抗体随着层流
  移动到检测线位置，与固定在检测线上的带有 His-tag 的蛋白发生特异性结合，并在检测线
  上形成紫红色条带；当含有 His-Tag 蛋白的待测样品通过金标垫时，His-Tag 金标抗体与待
  测样本中的 His-Tag 蛋白发生特异性的结合，样本中含有的 His-Tag 蛋白越多，与之结合的
  金标 His-Tag 抗体越多，剩余的游离 His-Tag 金标抗体越少，随着层流移动到检测线位置，
  游离的 His-Tag 金标抗体与固定在检测线上的带有 His-tag 的蛋白发生特异性结合，并在检
  测线上形成淡淡的紫红色条带或者不显带。当复合物移动到质控线时，His-Tag 金标抗体被
  包被在质控线的金标抗体二抗所捕获，并在质控线上形成紫红色条带。通过判读层析膜上检
  测线和质控线是否显色及显色的强弱，判断样品中是否存在 His-Tag 蛋白。本试剂检测下限
  为1ug/mL，即当待测样品中 His-Tag 蛋白的浓度达到1ug/ml 及以上浓度时，检测线的强度会
  被有效的削弱，显示出淡淡的紫红色条带或不显色。当检测样品中 His-Tag 蛋白浓度在
  1ug/mL 至10ug/mL 时，检测线颜色的深浅与样品中 His-Tag 蛋白的浓度呈负相关。当样本
  中的 His-Tag 蛋白浓度达到10ug/ml 以上时，检测线发生消线即无肉眼可见条带出现。
   

  二、用途

  原核表达系统、真核表达系统获得的 His-Tag 蛋白产物，均可以使用本检测试剂进行快

  速检测。
   

  三、组成

  1）检测卡；2）稀释液；3）说明书2 / 4
   

  四、使用方法

  1. 将本试剂包装打开，将检测卡平放在生物安全柜台面上；

  2. 待测样本的预稀释：

  若待测标签蛋白浓度已知，则利用试剂配套的稀释液直接稀释样本至 3ug/ml；

  若待测标签蛋白浓度未知，则利用试剂配套的稀释液对来源于细菌裂解液的待测样本进

  行 25 倍预稀释，对于来源于哺乳细胞裂解液的待测样本进行 5 倍预稀释，涡旋震荡混

  匀；

  3. 用微量移液器吸取 20μl 待检标本，滴加到样品孔中；

  4. 向样品孔中滴加 50μL 样品稀释液（滴瓶垂直滴加 2 滴），10-15 分钟后即可判读结果。

  注： 如果经过预稀释操作后的样本检测结果显示检测线显色极为微弱、肉眼难以判别，则

  存在样本浓度过高的可能性（如预稀释操作后的样本浓度超过 3μg /ml），那么建议将预稀

  释后的样本进行第二次 10 倍稀释后重复检测，如果观察到检测线有可见条带产生，那么说

  明初次检测确实是蛋白浓度过高引起的检测线显色微弱；如果怀疑蛋白浓度过低造成检测线

  显色与阴性对照检测线显色差异难以分辨，可以降低预稀释操作中的稀释倍数至 3 倍，我们

  不建议预稀释倍数低于 3 倍，因为在这种情况下的检测结果容易受到蛋白溶液中复杂成分的

  干扰导致检测准确性降低
   

  五、常见洗涤剂与盐的兼容性上限如下表：

  名称	浓度上限
  NaCI	0.5M
  Urea	0.4M
  TritonX-100	1%
  Tween-20	1%
  SDS	0.2%
  NP-40	1%
  EDTA	5mM
  甘油	10%
  KCI	0.5M
  CHAPS	1%
  RIPA	100%

   

  六、结果判断

  1. 在检测窗中，质控线和检测线均显色，且检测线显色强度与阴性对照一致即为阴性；

  2. 质控线显色，检测线不显色或者检测线显色强度明显弱于阴性对照，检测结果为阳性；

  3. 质控线不显色，无论检测线是否显色，均表明试剂失效，检测无效。

  

  七、问题及解决
   

  现象	可能的原因	解决
  检测线相较于阴性对 照没有出现可见的显 色削弱	待测样本中不含有 His-Tag 蛋白	检查是否使用了与待测样本对应的检测卡
  检测线相较于阴性对 照没有出现可见的显 色削弱	待测样本中不含有 His-Tag 蛋白	通过 ELISA 或 WB 方法验证标签蛋白的存 在
  检测线显色强度很微 弱	样本浓度高于检测 卡的工作浓度范围 上限	对待测样本进行二次稀释后重复测试
  质控线没有出现可见 条带	误操作	请按照说明书操作步骤重复检测，并确认样 本中添加的裂解和萃取试剂浓度在推荐范 围内
  质控线没有出现可见 条带	检测卡超过效期	请使用效期内的检测卡

  
   
  检测范围约为1ug/mL至10ug/mL（具体以批次报告为准）

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产品详情

货号	规格
BF06221-10	10条
BF06221-100	100条

常温保存，保质期一年
 

一、简介

His 标签蛋白（竞争法）快速检测试剂盒（高敏版）是基于胶体金侧向层析技术的蛋白

半定量检测试剂。主要结构由样品垫、金标垫、层析膜、吸水纸、背板等组成。在层析膜上

固定有金标抗体的二抗（质控线）和带有 His-tag 的蛋白（检测线）；在金标垫上固定有胶

体金标记的抗 His-Tag 的单克隆抗体。当待测样品滴加到样品垫时，通过毛细作用，液体向

金标垫移动。当不含有 His-Tag 蛋白的待测样品通过金标垫时，His-Tag 金标抗体随着层流

移动到检测线位置，与固定在检测线上的带有 His-tag 的蛋白发生特异性结合，并在检测线

上形成紫红色条带；当含有 His-Tag 蛋白的待测样品通过金标垫时，His-Tag 金标抗体与待

测样本中的 His-Tag 蛋白发生特异性的结合，样本中含有的 His-Tag 蛋白越多，与之结合的

金标 His-Tag 抗体越多，剩余的游离 His-Tag 金标抗体越少，随着层流移动到检测线位置，

游离的 His-Tag 金标抗体与固定在检测线上的带有 His-tag 的蛋白发生特异性结合，并在检

测线上形成淡淡的紫红色条带或者不显带。当复合物移动到质控线时，His-Tag 金标抗体被

包被在质控线的金标抗体二抗所捕获，并在质控线上形成紫红色条带。通过判读层析膜上检

测线和质控线是否显色及显色的强弱，判断样品中是否存在 His-Tag 蛋白。本试剂检测下限

为1ug/mL，即当待测样品中 His-Tag 蛋白的浓度达到1ug/ml 及以上浓度时，检测线的强度会

被有效的削弱，显示出淡淡的紫红色条带或不显色。当检测样品中 His-Tag 蛋白浓度在

1ug/mL 至10ug/mL 时，检测线颜色的深浅与样品中 His-Tag 蛋白的浓度呈负相关。当样本

中的 His-Tag 蛋白浓度达到10ug/ml 以上时，检测线发生消线即无肉眼可见条带出现。
 

二、用途

原核表达系统、真核表达系统获得的 His-Tag 蛋白产物，均可以使用本检测试剂进行快

速检测。
 

三、组成

1）检测卡；2）稀释液；3）说明书2 / 4
 

四、使用方法

1. 将本试剂包装打开，将检测卡平放在生物安全柜台面上；

2. 待测样本的预稀释：

若待测标签蛋白浓度已知，则利用试剂配套的稀释液直接稀释样本至 3ug/ml；

若待测标签蛋白浓度未知，则利用试剂配套的稀释液对来源于细菌裂解液的待测样本进

行 25 倍预稀释，对于来源于哺乳细胞裂解液的待测样本进行 5 倍预稀释，涡旋震荡混

匀；

3. 用微量移液器吸取 20μl 待检标本，滴加到样品孔中；

4. 向样品孔中滴加 50μL 样品稀释液（滴瓶垂直滴加 2 滴），10-15 分钟后即可判读结果。

注： 如果经过预稀释操作后的样本检测结果显示检测线显色极为微弱、肉眼难以判别，则

存在样本浓度过高的可能性（如预稀释操作后的样本浓度超过 3μg /ml），那么建议将预稀

释后的样本进行第二次 10 倍稀释后重复检测，如果观察到检测线有可见条带产生，那么说

明初次检测确实是蛋白浓度过高引起的检测线显色微弱；如果怀疑蛋白浓度过低造成检测线

显色与阴性对照检测线显色差异难以分辨，可以降低预稀释操作中的稀释倍数至 3 倍，我们

不建议预稀释倍数低于 3 倍，因为在这种情况下的检测结果容易受到蛋白溶液中复杂成分的

干扰导致检测准确性降低
 

五、常见洗涤剂与盐的兼容性上限如下表：

名称	浓度上限
NaCI	0.5M
Urea	0.4M
TritonX-100	1%
Tween-20	1%
SDS	0.2%
NP-40	1%
EDTA	5mM
甘油	10%
KCI	0.5M
CHAPS	1%
RIPA	100%

 

六、结果判断

1. 在检测窗中，质控线和检测线均显色，且检测线显色强度与阴性对照一致即为阴性；

2. 质控线显色，检测线不显色或者检测线显色强度明显弱于阴性对照，检测结果为阳性；

3. 质控线不显色，无论检测线是否显色，均表明试剂失效，检测无效。

七、问题及解决
 

现象	可能的原因	解决
检测线相较于阴性对 照没有出现可见的显 色削弱	待测样本中不含有 His-Tag 蛋白	检查是否使用了与待测样本对应的检测卡
检测线相较于阴性对 照没有出现可见的显 色削弱	待测样本中不含有 His-Tag 蛋白	通过 ELISA 或 WB 方法验证标签蛋白的存 在
检测线显色强度很微 弱	样本浓度高于检测 卡的工作浓度范围 上限	对待测样本进行二次稀释后重复测试
质控线没有出现可见 条带	误操作	请按照说明书操作步骤重复检测，并确认样 本中添加的裂解和萃取试剂浓度在推荐范 围内
质控线没有出现可见 条带	检测卡超过效期	请使用效期内的检测卡

 

检测范围约为1ug/mL至10ug/mL（具体以批次报告为准）