BCA蛋白定量检测试剂盒(即用型)

货号: BF06240
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规格 价格 货期 数量
  • 500T
    380.00
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产品基本信息

  • 产品货号 BF06240
  • 产品名称 BCA蛋白定量检测试剂盒(即用型)
  • 类别 免疫检测
  • 推荐应用 WB

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产品详情

 试剂盒组成 500T
试剂A 100ml
试剂B 1.5ml×2
BSA标准品2000 μg/mL 1ml
BSA标准品1500 μg/mL 1ml
BSA标准品1000 μg/mL 1ml
BSA标准品750 μg/mL 1ml
BSA标准品500 μg/mL 1ml
BSA标准品250 μg/mL 1ml
BSA标准品125 μg/mL 1ml
BSA标准品0 μg/mL 1ml

保存温度: 4保存,一年有效

产品介绍
BCA蛋白定量试剂盒是一种基于二喹啉甲酸BCABicin-choninic Acid),利用比色法测定总蛋白浓度的试剂盒,是目前广泛使用的蛋白定量方法之一。其原理为在碱性条件下蛋白质中的肽键将Cu2+还原成Cu+BCA螯合Cu+作为显色剂,产生蓝紫色复合物并在562 nm处有吸收峰,颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,可根据吸收值的大小来测定蛋白质的含量。
BCA蛋白定量试剂盒(即用型)是在常规BCA蛋白定量试剂盒基础上研制的含有一系列浓度的蛋白质标准品(BSA溶液),即取即用,无需稀释,方便快捷。


操作步骤
  1. 将配套组分试剂从4冰箱取出恢复至室温,上下颠倒混匀备用。
  2. 计算确定所需的工作液的总体积:
BCA工作液的总量=BSA标准品样本个数+待测样本个数)×复孔数×每个样本所需BCA工作液的体积
举例:本次试剂盒质检需要做BSA标准品样本个数为8个,待测样本个数3个,复孔数为3个。
BCA工作液的总量=8+3×3×200 μL(每个样本工作液体积)=6.6 mL
  1. 根据计算出的BCA工作液的体积,将试剂A与试剂B按照50:1的体积比,配制BCA工作液,并充分混匀。
注:1)由于加样可能存在误差,建议配制工作液的时候多配制1~2个孔的量;
2)当试剂B加入到试剂A时,开始可观察到有浑浊产生,属于正常现象,经搅拌后浑浊会迅速消失,得到苹果绿色澄清工作液。
  1. 取各个稀释浓度的BSA标准品20 μL,加入到96孔透明板中;
  2. 在每个孔中加入200 μL工作液充分混匀,盖上96孔板,37℃恒温培养箱孵育30分钟;
  3. 用酶标仪测定每个样品及BSA标准品的A562或者540~590 nm之间的其它波长的吸光度;
  4. 绘制标准曲线,计算样品中的蛋白浓度。
注:1)每个样品及BSA标准品的A562需要减去空白对照的吸光度;
2)数据处理时需要剔除明显异常的点或者数值;
3)样品浓度如果太高超过上限(2000 μg/mL)应该适当进行稀释,样品浓度太低建议适当浓缩

注意事项
  1. 试剂A如果低温条件下出现絮状结晶时,可37℃使其完全溶解,不影响使用;
  2. 试剂组分使用前请先上下颠倒混匀;
  3. 建议每次测定蛋白样品时,都要绘制标准曲线,使测量结果准确;
  4. 为了提高样品测量结果的准确性,样品浓度不宜太高或者太低,否则需要提前稀释或者浓缩;
  5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

文献引用 (7)

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