产品基本信息
-
产品货号
BDAA0241
-
产品名称
BioMag Flag标签免疫沉淀/免疫共沉淀试剂盒
-
类别
纯化试剂
产品详情
产品介绍：
1.1 BioMag 系列
BioMag系列的Bio源自本公司名称“Biodragon”的前缀，Mag代表“Magnetic（磁性）”，含有BioMag的均为高聚物磁性微球产品。目前BioMag系列主要是基于抗体亲和方法标签蛋白 IP 试剂盒，包括 Anti-His-tag、Anti-Myc-tag、Anti-HA-tag、Anti-Flag-tag、Anti-GFP-tag 和 Anti-RFP-tag 共六种标签 IP 试剂盒。未来，我们将根据客户需求开发更多 BioMag高聚物磁珠相关产品。
1.2 Flag 标签
Flag 肽段是融合蛋白表达纯化过程中最常用的标签（tag）之一。它可以连接在融合蛋白的 N 端、C 端或序列中间，具有极好的亲水性，更容易展示在融合蛋白的表面，干扰融合蛋白功能的可能性较小。这一标签还具有一个优势：连接在目的蛋白的 N 端时，可以被Enterokinase (EK protease) 从序列 C 端赖氨酸的位置切除，而不留下冗余残基。
1.3 Anti-Flag 抗体
Flag标签肽是由8个氨基酸（DYKDDDDK）组成的一个亲水性短肽，DYKDDDDK 肽段也经常被称为 Flag 肽段， 一系列抗 DYKDDDDK 标签的抗体分别为 Anti-Flag M1、Anti-Flag M2、Anti-Flag M5 等，其中 M2 抗体广泛用于免疫杂交、免疫沉淀、亲和纯化等方向。本公司的Anti-Flag 抗体，亲和力较高，适合做 WB、IP 等蛋白互作实验。
1.4 试剂盒组分
抗体与对应的标签之间有特异性的结合，将抗体偶联在 Beads 上，就可以把带有对应标签的融合蛋白结合到 Beads 上。经过缓冲液去除杂蛋白等步骤之后，融合蛋白可以使用变性剂或者高温处理等方式从 Beads 上洗脱下来。为方便使用，本试剂盒提供多种试剂方便客户更好的进行蛋白互作实验。
1.5 洗脱缓冲液说明
Elution Buffer D 含有高浓度尿素以及去垢剂，可以充分洗脱标签蛋白，且能保证磁珠上的抗体只有很少量的脱落，但是有可能会在磁珠上仍有少量目的蛋白残留；也可以直接加入试剂盒中的 SDS Loading Buffer，95-100℃高温处理 5-10min，目的蛋白能够完全从磁珠上脱离，但是抗体也会完全脱落，后续 WB 实验时需要慎重选择二抗的种属。
1.6 阳性对照蛋白
试剂盒提供了带有 Flag 标签的红色荧光蛋白 , 这一蛋白在自然光下带有肉眼可见的红光，可以用来验证 Beads 的结合载量，以及排除操作流程中可能出现的偏差。这一蛋白为真核表达，SDS-PAGE 上显示为 3 条具有不同分子量的条带。带有 Flag 标签的不同蛋白与Beads 的结合时间、结合条件、洗脱条件具有类似性，可以平行参考。但是考虑到蛋白质与 Beads 之的结合是浓度依赖的关系，阳性对照蛋白的操作条件不宜一成不变的照搬。
1.7 磁珠性质
高聚物磁珠采用高分子聚合技术将超顺磁性材料和高分子材料完美地结合在一起，具有更快的磁响应性同时保持微球良好的分散性、极低的非特异性吸附和更丰富的结合位点。BioMag Anti-Flag Beads 是利用生物素（Biotin）和链霉亲和素（SA）蛋白之间高亲和力的原理，首先将 SA 蛋白高密度偶联到 BioMag 磁珠上，再将生物素化 Flag 抗体与 SA 高聚物磁珠非共价偶联制备而成，从而避免化学共价偶联造成抗体的失活，因此 BioMag Anti-Flag Beads 具有更高的抗体偶联密度以及抗体比活力。可用于原核和真核细胞裂解物或者培养上清中分泌表达的 Flag 标签蛋白的 IP、Co-IP 等蛋白质相互作用实验，通过磁力架或自动分离仪器对磁珠进行分离，方法简单、高效便捷。
收藏
电话咨询
在线咨询
QQ
二维码
扫码二维码
