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常见问题
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Q1:
说明书里,有“柱体积”和“介质体积”两个概念,请问有什么区别?
说明书中柱体积和介质体积指的是相同的意思,就是指取用的填料体积。
Q2:
试剂PH为什么都是8.0?我的蛋白要求PH=7.0保持活性,可以调节buffer的PH吗?
组氨酸标签亲和纯化推荐结合条件是中性偏碱,可以根据蛋白等电点适当调整ph,不是所有蛋白都在ph7条件下能维持稳定状态。说明书中的缓冲液配方是一个建议配方,客户可以根据自己的样品特点适当调整ph范围,推荐ph范围7-8.5。
缓冲液可以用盐酸调节到 ph7.0,蛋白溶液如果已经是ph偏高,不能直接用盐酸调节ph,可以用调节ph后的缓冲液对样品进行稀释或者透析
Q3:
洗脱有杂质,达不到理想的纯度怎么办?
如果还需要在这一步纯化上进一步提升蛋白纯度,可以在wash buffer清洗后,继续用50mM咪唑,100mM咪唑,150mM咪唑,250mM咪唑分别清洗收集蛋白,并检测各组分洗下来的蛋白纯度,获得自身样本最适的洗杂和洗脱条件。
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