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常见问题
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Q1:
步骤3中,为什么6-12小时~80%被清除后,要换一次液?
不换液也可以尝试的,对细胞没有伤害。推荐按照我们的质控操作换液,只是想让已经被杀死的黑胶虫尸体及时移除。好使后续培养更加干净
Q2:
第5步中,说明书建议去除黑胶虫后,后续培养过程中仍在培养基中持续添加试剂B,需要加多久?
可以随时停止添加,但是因为黑胶虫很容易再起来,所以建议试剂B添加10代以上,或者一直添加到实验结束,都没问题。
Q3:
悬浮细胞是否可以使用?
很遗憾,我们目前没有做过此方面的测试。理论上是可以尝试的。方法上,对悬浮细胞来说,因为不贴壁,所以说明书中关于贴壁前,贴壁后的说明就都无意义了。建议直接在培养基中添加说明书中浓度的黑胶虫去除试剂即可。A试剂跟B试剂同时添加,同样的,试剂A添加不要超过3代,试剂B可以一直添加。
Q4:
我的细胞要很久传一次代,说明书写的是传代的时候才可以加,现在污染了,能不传代直接加吗?
不传代可以加,对细胞没有任何影响,但是可能对黑胶虫的灭杀效果不好。像这种情况,建议1:1传代,或者1:0.5传代,也就是说,需要消化下来重新到一个新的相同面积的孔里或者更小的孔里(比如六孔板一个孔消化后到12孔板一个孔),让细胞重新贴壁。在这个过程中进行加药灭杀,效果会更好。另外,如果是很久传一次代的细胞,建议试剂A的添加时间不要太久,比如处理24-48小时候就去除换新的培养基,然后在新的培养基中一直持续添加试剂B即可。
Q5:
加黑胶虫去除剂的时候,双抗需不需要暂时停掉?
双抗跟我们的试剂没有任何交叉反应,不需要去除。
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