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常见问题
常见问题
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Q1:
产品包含什么
我们提供的两个细胞是:(1)阴性细胞=空白载体对照+puro(也就是用空病毒感染的细胞,使得细胞具有了在puro环境中生长的能力)(2)阳性细胞=转入ACE2的293细胞+puro
Q2:
培养基是否需要添加双抗
可以不加双抗,如果培养环境比较复杂,建议加双抗以免污染。嘌呤霉素puromycin作用:筛选293T过表达ACE2细胞,抑制阴性的没有ACE2过表达的细胞生长。高浓度药物维持(嘌呤霉素)对细胞生长有影响
Q3:
发冻存管还是T25瓶
看客户需求,想要冻存的就是发货冻存管,想要复苏的我们就发货T25瓶,默认是发货冻存管的
Q4:
培养是否需要一直加Puromycin
传代1-2次加药筛一下就可以,不需要一直维持;高浓度药物维持对细胞生长也有影响的
Q5:
细胞复苏步骤及培养条件
复苏:37℃水浴;培养条件:10%FBS+DMEM;Puromycin浓度:5μg/ml
Q6:
是否做过流式验证
没有,ACE2稳定细胞株我们也有单克隆,是用有限稀释法做的,最后用病毒瞿感染验证。有客户构建过ACE2-mcherry的293t细胞,他们拿回去做的流式是没问题的,但是我们没有实验数据。
Q7:
产品包含什么
阴性细胞=空白载体对照+puro;阳性细胞=转入ACE2的293细胞+puro
Q8:
培养是否需要一直加Puromycin
传代1-2次加药筛一下就可以,不需要一直维持
Q9:
细胞复苏步骤及培养条件
复苏:37℃水浴;培养条件:10%FBS+DMEM;Puromycin浓度:5μg/ml
Q10:
是否有流式验证
没有流式验证,验证方法是用病毒感染验证的
Q11:
能否提供ACE2稳定细胞株的实验数据
没有ACE2稳定细胞株的实验数据
Q12:
293t 细胞能否用于病毒扩增
可以的,293T细胞可用于病毒扩增,但需要携带病毒扩增相关基因的载体,如pCD513B1。
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