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常见问题
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Q1:
这个产品做化学发光免疫分析,类似ELISA模式。因实验需求,HRP用量较多,导致了光很强又淬灭很快的问题。请问A液和B液可以稀释嘛?用什么稀释?优先稀释哪个?
A液和B液可以使用纯水稀释。ECL化学发光试剂盒规格较大,elisa模式尝试并不怎么损耗试剂,A液和B液都可以尝试稀释一下。
Q2:
EGF的human和mouse同源性很低,只有55%。但你们有mouse的验证数据,所以是可以用在mouse上的是吗?
对的,可以的。这个方法是药典使用方法,是没问题的。目前业界基本都是用的这个方法。
同源性不是唯一判断标准。只要human的细胞因子,有mouse数据的,都是这种情况,哪怕同源性低,也是可以用的
Q3:
细胞因子这块,种属重要吗?还是序列同源性高,差异就不大?我要mouse的,你们只有human的,而有的活性数据里有用在小鼠细胞上的,有的没有小鼠的数据
理论上只要序列同源性高,活性差异就不大。同源性低的,在不同种属里使用剂量就会有差异,比如在L929小鼠的这个细胞,参考R&D的数据的话,human TNFa 活性作用在鼠上要比鼠源TNF-a的活性要弱4~5倍的样子,也就是效果是不如鼠源TNF-a的。
Q4:
我们为什么要在小鼠细胞里验证?没有Human的数据
用小鼠的这个细胞验证主要是因为人源细胞比较难采购,而且国内外知名品牌都是用鼠源L929做的测试
Q5:
sp20细胞的培养基里,谷氨酰胺还要额外再添加一次吗?1640里不是有谷氨酰胺吗?
一般1640培养基是含有的,但是有的时候放置过程可能会降解。为了保险起见,我们建议是添加上
Q6:
这个组织直扩的试剂盒,能用于小鼠细胞样品吗?
可以用于小鼠组织以及细胞样本的直扩
Q7:
我买的500ml弗氏完全佐剂里有细小的白色颗粒物,应该没有影响吧?
弗氏完全佐剂里正常情况都有点沉淀,因为有分枝杆菌,充分混匀使用即可。10ml规格比较小,所以不是很明显,大包装会比较明显一些,其实都有
Q8:
博奥龙弗式完全佐剂和不完全佐剂的区别?
完全佐剂与不完全佐剂的区别是,完全佐剂含有的超声结合水浴加热灭活的分枝杆菌
Q9:
金颗粒的直径是多少纳米的?能做电镜吗?
25nm,没有测试过电镜
Q10:
QuickAntibody小鼠和兔子的佐剂,能否混用?小鼠的能给兔子用吗?
兔佐剂和小鼠佐剂不混合,种属特异性,不建议混合使用
Q11:
文献中常见Thermo的剂量是氢氧化铝2mg,50ul,换成博奥龙的,假设我仍需要注射2mg氢氧化铝,需要多少ul?
可参考以下计算方式:
① Thermo 77161 定量是 40mg/ml氢氧化铝(AI(OH)3,78.004g/mol),换算后铝离子(AI3*,26.98 g/mol)浓度为13.83mg/ml
②博奥龙佐剂铝离子含量:10mg/ml.
50ulx13.33mg/mL÷10mg/ml=69.175ul
或,2mgx26.98 g/mol÷78.004 g/mol÷10mg/ml=69.17ul
即,氢氧化铝2mg需取用~70ul佐剂
Q12:
小鼠造摸,我们推荐用量50~100ug(铝离子每次),thermo 产品 77161 文献报道使用 60ul,按照换算过来 铝离子浓度是0.8mg 每次,两种用量差别比较大,如何取舍?
说明书中提供的是抗体制备所需参考剂量,非造模剂量。请根据文献摸索合适的剂量,不同品牌佐剂工艺及配比存在差异,因此不同品牌提供的参考剂量存在差异。文献常见剂量可以作为参考起点,请根据评价结果调整,并确定最适的小鼠株系、致敏间隔、过敏原类型和剂量、佐剂类型和剂量等。
Q13:
是无菌还是有菌的?
无菌分装的
Q14:
氢氧化铝佐剂是多大的颗粒?
微米级
Q15:
可以用多少次
不同组织切面的面积不同,以覆盖样品最佳,通常在50~100uL/Test,博奥龙的 mIHC试剂盒为荧光标记的Tyramide即用型规格(1mL,2mL,5mL),即1mL对应检测样本数量是10-20T,2mL是20-40T,5mL是50-100T。
Q16:
Q:我用弗式佐剂免疫小鼠,已经免了4次,2周一次,测过效价感觉一般;现在换个免疫原,接着免疫同一只小鼠,看能否提高效价,麻烦看一下哪个佐剂合适?怎么操作?
A:之前有客户尝试过换我们QuickAntibody 5W佐剂,按照说明书周期免疫2针;要是实在赶时间,也可以试试3W 2针的那个水佐剂。但免疫系统的功能随年龄增长而减退,所以继续免疫可能会增加鼠龄不合适的风险
Q17:
能否用于重组单抗的亚型鉴定?
我们试剂测试的是杂交瘤 ,不是重组单抗。亚型鉴定试剂盒不能用于重组单抗的检测。如果是cho,或者293表达的重组抗体不是很推荐,重组的不承诺会反应
Q18:
血清有没有去胎脂
没有去胎脂 ,就是正常胎牛血清
Q19:
二抗用什么?
二抗用 HRP-山羊抗人IgM ,如货号: BF03032
Q20:
G柱纯化,洗柱子的这个6M盐酸胍溶液有ph要求吗
选ph8.7盐酸胍溶液
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