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常见问题
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Q1:
为什么必须快溶？
慢溶容易产生沉淀（预计是VLP聚集产生的较大颗粒导致了沉淀），因此本产品化冻的时候需要速溶，可以常温或者37度水浴锅速溶，不建议使用放到冰盒里慢溶的常规方式。
Q2:
我哺乳动物细胞做的重组抗体，洗脱不下来，有其他的洗脱液或者优化建议吗？
可以尝试用0.1M 柠檬酸-柠檬酸钠，ph3.0的条件进行洗脱。
如果一直洗不下来可能是客户的抗体和填料的结合力比较强， 需要尝试其他抗体纯化填料 例如protein A
Q3:
IFA是什么实验方法？
间接免疫荧光法(indirect immunofluorescent assay，IFA)。RSV感染细胞，铺板，待细胞至~90%丰度后，PBS洗涤、固定、封闭，然后其他步骤与ELISA一致，添加抗体，但二抗不是HRP标记的二抗，而是FITC或罗丹明标记的二抗。
Q4:
请问是放几号电池？有什么要求吗？
需自备两节5号电池。请注意不要使用南孚电池，电量过大会有烧毁的风险。
Q5:
这个产品的保存温度是4度，我放-20放了一天还能用吗？
也可以-20°，没关系
Q6:
你们公司这边保存的，都怎么扩大？
我们一般很少去做直接扩增，因为扩增回丢失多样性。
我们一般都是保留的DNA和最初的菌种，但是菌种放久了之后也会出现扩增不起来的问题，所以如果菌种能够扩增起来，再重新收，这是一种方式；另外，如果菌种扩增不起来，DNA是可以保存比较久的，我们就重新做电转，重新再扩增再收。
Q7:
可以用于荧光WB吗？
若使用近红外荧光成像系统（如Odyssey成像系统），橙色荧光染料将不可见。
Q8:
为什么有封片剂了还需要中性树胶？
试剂盒里的封片剂是半永久的，若玻片样本需长久保存，需要再使用指甲油或者中性树胶对盖玻片四周进行密封
Q9:
这个反复冻融有影响吗？
没影响，可以反复冻溶
Q10:
这个抗体对 能检测嵌合抗体中的人源Fc吗？
天然的FC肯定可以，人源fC不能保证一定识别。因为不是所有的人源FC都有完全一样的构象
Q11:
为确保抗原有效吸附在铝佐剂上推荐混匀多长时间？
混匀后静置半小时，如果有沉降用前可以再摇一摇
Q12:
我们mIHC的染料是超强荧光防淬灭的吗？就是染完后，放几天后还能看到颜色吗？还是得尽快观察？
是超强荧光防淬灭的，放几个星期都没有关系
Q13:
乳化失败的原因有哪些？失败了该怎么办？
1. 佐剂成分问题： 弗氏完全佐剂由油相（一般为矿物油）和水相（一般为生理盐水）组成。如果这两个相的配比不正确或者其中某一方受到了污染，可能导致乳化失败。
2、温度问题： 乳化是一个温度敏感的过程。在制备弗氏完全佐剂时，需要确保在适当的温度下进行，通常在室温或稍高于室温的条件下。温度过低或过高都可能影响乳化效果。
3、搅拌力度： 乳化过程中，需要有足够的搅拌力度来使油相和水相充分混合。如果搅拌不够充分，乳化效果可能不佳。 搅拌时间： 乳化需要一定的时间来确保充分的混合。过短或过长的搅拌时间都可能影响乳化的质量。
4、佐剂老化： 弗氏完全佐剂的质量会随着时间的推移而下降。如果佐剂过老，其中的乳化剂可能已经失去了活性，导致乳化效果不佳。
5、材料质量： 使用低质量或受到污染的油相或水相都可能导致乳化失败。 如果在制备弗氏完全佐剂时遇到乳化失败的问题，可以尝试优化上述因素，调整配比、温度、搅拌条件等。
6、更改抗原佐剂的使用比例：由佐剂：抗原 1:1，提高至1:2，增加抗原用量。
7、条件允许的话，可以直接免疫测试能否满足需求。
此外，检查所有用到的材料，确保它们的质量良好。在实验过程中，注意保持操作的干净和规范，避免外部污染的引入。如果问题持续存在，可能需要重新准备佐剂或考虑使用其他适当的佐剂 注意：补加上抗原含有SDS或者有机物，会影响乳化效果。
注：更换QuickAntibody系列水性佐剂，无需乳化，免除乳化烦恼。
Q14:
我的蛋白加了GST标签，还是在包涵体里，怎么纯化呢？
GST标签本身是一种高度可溶的蛋白质，当与目标蛋白融合表达时，能促进融合蛋白在宿主细胞（如大肠杆菌）中的正确折叠，减少形成包涵体（insoluble aggregates）的倾向，从而显著提高重组蛋白的可溶性表达水平。可以尝试低温诱导等条件增加可溶性表达。
包涵体蛋白可以尝试尿素(6-8M)、盐酸胍(6M)等变性，透析复性，测定蛋白活性满足要求可以继续后续纯化。尿素、盐酸变性条件下，会影响挂柱。复性后透析成柱子兼容的平衡buffer，或者PBS常规buffer，就可以继续尝试挂柱纯化
Q15:
这个产品的造模相关文献里都是25-50μg OVA蛋白，需要加入2-4mg 铝佐剂，想问下这里的铝佐剂胶体总体质量，还是胶体内的Al(OH)3纯物质，还是你们说明书给的铝离子含量？为什么有时候给的又是Al₂O₃含量？
您现在查阅到的文献多以Thermo早期货号为主，该产品当时说明书中给的是【 aluminum hydroxide (40mg/mL) 】，所以早期文献常见的是氢氧化铝含量2-4mg。
但实际上铝胶佐剂，虽然习惯被称为aluminum hydroxide，并不是确切的氢氧化铝（Al(OH)3），而是无定形或部分结晶的铝氧氢氧化物（AlO(OH)·nH₂O），并含有一些其他成分。在疫苗佐剂、抗酸剂或化妆品等制药应用中，以符合FDA、USP等其他标准，铝含量常需以更稳定、便于分析的Al₂O₃为基础提供COA报告（Assay Al2O3 %，Al₂O₃代表其“无水”或脱水形式，通过加热Al(OH)₃可得到Al₂O₃），进一步可换算为我们说明书标注的铝离子浓度，以反映了凝胶的复合性质。
有任何一种形式的含量，您都可以互相转换：Al(OH)₃ 分子量78， Al₂O₃ 分子量102，Al分子量26.98。
Q16:
请问闪电克隆试剂盒的引物设计方法有什么要求吗？
该产品通过同源重组法实现DNA克隆，原理与无缝克隆、Gibson克隆类似，遵循引物设计一般原则，无特殊要求。您可以通过说明书查看更多细节，或通过各类公共平台搜索此类关键词：无缝克隆、Gibson克隆、同源重组、引物设计等。
Q17:
佐剂乳化器 保修期是多久呢？损坏了可以维修吗？
该产品关键部件为马达和乳化针头，属于耗材类产品，查收后请在1周内完成运行测试，暂无法支持提供维修配件。如有特殊情况，可进一步与我们沟通
Q18:
添加因子本身就含有胎牛血清、链霉素、青霉素，我配培养基的时候还需要额外添加吗？
Hybridoma Feeder添加因子只作为细胞培养添加剂使用，不可代替血清、双抗，请根据需求单独额外添加血清和双抗。
Q19:
【慢病毒滴度快速检测试剂盒】里的缓冲液丢了，能用培养基或者PBS等其他试剂取代吗？
不能，层析液有裂解成分等关键组分，无法替代。
Q20:
慢病毒样本需要像ELISA试剂盒里一样先裂解预处理吗？
无需进行预处理。【慢病毒滴度快速检测试剂盒】的层析液即裂解液，在层流过程中即可将慢病毒样本进行较为充分的裂解，不影响检测结果。
ELISA检测有样本裂解步骤，而胶体金检测为滴加层析液（裂解液）在层流中进行样本裂解。对于样本是否充分裂解，我们进行过对比实验，即一组只利用层析液，另一组额外在裂解液中裂解0-60min，使用胶体金检测，结果未见显著增强。即裂解液在层流中裂解较为充分，即便有增强也可控制在胶体金方法15%的变异范围之内，而且检测卡本身也属于半定量检测方法。
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