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常见问题
常见问题
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Q1:
说明书步骤2中,最终定容体积小于0.5ml,是否会影响标记效果?
不影响,譬如标记0.2mg抗体,可定容至150ul
Q2:
我的纯化没富集到抗体,流穿和洗洗杂、洗脱液,可以再拿去过一遍柱子吗?
可以的,不过如果样品本身的抗体量就不是很多,可能再次纯化获得的抗体量也不会很多,甚至因为损耗会更少
Q3:
请问这个磁珠,可以回收使用吗?可以回收几次?
如果是用多肽竞争洗脱或者酸性洗脱,可以再生重复使用3-5次。如果是变性洗脱,无法再生重复使用。
Q4:
这款能做CRISPR-Cas9 RNP基因编辑的数据有吗?用量信息呢?
Cas9 protein, sgRNA, 蛋白转染试剂,质量比,分别是2, 1, and 4 μg/mL,可以自己在此基础上优化
Q5:
二抗的特异性是否做过实验验证,与其他的亚型或其他物种的同种亚型有无交叉反应?
抗亚型的二抗,都和该物种其他亚型无交叉,如抗小鼠IgG2a和抗小鼠IgG2b、抗小鼠IgG1、抗小鼠IgG3、抗小鼠IgA、抗小鼠IgM无交叉;但没有做过和其他物种亚型是否交叉。
我们的二抗,同物种范围内,都具备特异性,排除交叉问题。需要排除不同物种之间交叉反应的二抗,可以联系我们进行个性化定制。
Q6:
加到细胞里面后,背景是什么样的?
Q7:
溶解后什么状态?
Q8:
IFA是什么实验方法?
RSV感染细胞,铺板,待细胞至~90%丰度后,PBS洗涤、固定、封闭,然后其他步骤与ELISA一致,添加抗体,但二抗不是HRP标记的二抗,而是FITC或罗丹明标记的二抗。
Q9:
IFA是什么实验方法?
RSV感染细胞,铺板,待细胞至~90%丰度后,PBS洗涤、固定、封闭,然后其他步骤与ELISA一致,添加抗体,但二抗不是HRP标记的二抗,而是FITC或罗丹明标记的二抗。
Q10:
IFA是什么实验方法?
RSV感染细胞,铺板,待细胞至~90%丰度后,PBS洗涤、固定、封闭,然后其他步骤与ELISA一致,添加抗体,但二抗不是HRP标记的二抗,而是FITC或罗丹明标记的二抗。
Q11:
这里是否含有氢氧化镁?
不含Mg2+
Q12:
我们的HPV的假病毒,能否感染hela细胞?
我们没有实验数据,所以也不确定。
一般HPV假病毒的感染实验都是用的293细胞,而且普通的293细胞效果可能都不行,必须是293FT或者293TT
Q13:
准备用HPV假病毒做中和实验,一般接种疫苗后,采集的人的血清大概稀释多少倍后进行中和实验,有没有测试过大概区间?
不同的疫苗和样品都不一样,一般都是需要先做梯度实验,可以先做100/1000/10000 三个梯度看看效果,再进行进一步的优化
Q14:
假病毒收毒是否只取细胞上清,是否需要对细胞进行裂解
大致流程:转染--去上清-裂解-取上清
Q15:
为什么没有荧光素酶Luciferase的假病毒
因为gfp的足够灵敏了,而且gfp的成本更低;Luciferase的假病毒,使用起来成本很高,还需要底物
Q16:
有没有荧光素酶Luciferase HPV假病毒
没有
Q17:
只能用于L1实验,还是可以同时进行L1和L2的实验
假病毒表面同时有L1和L2蛋白,可以进行L1的相关中和实验研究,也可以进行L2的相关中和实验研究。
Q18:
针对GFP假病毒的中和实验,可以最后破膜染GFP做流式检测么
流式检测也可,只要可以检测GFP的量就行,这个量和假病毒侵染正比。
Q19:
中和实验中,72h后检测中间需要换液吗?培养基变黄是否影响细胞的状态?
72h后检测,中间不需要换液。适当变黄是正常的,不会影响细胞状态。同时也要注意,要求刚开始的接种细胞数不能太多,最好是按照我们建议的细胞数量接种
Q20:
HPV16 、HPV 18的GFP序列可以提供吗
GFP是常规的,但是经过密码子优化,具体序列不方便对外提供
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